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分光光度计百定量的基础是光吸收定律:A=KcL或者A=εcL,及是根据溶液对光的度吸收程度来定量的。
如果比色皿中存在气泡,气泡会对光有一个知折射作用,这同样会导致通过溶液后的光强减弱,吸光度增加,致使测量的浓度变道大。当然这是一般情况,在特殊情况下内,如果溶液本身颜色比较深,吸光度容很强,气泡的存在即便有折射作用也不如吸收作用强,同样会导致吸光度减小。
推荐答案中的“一般选择最大波长,是为了减少实验误差。”应改为“一般选择最大吸收波长,是为了减少实验误差。”
分光光度法的标准曲线定义:标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。
绘制标准曲线意义:绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。
物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。
由于不同的物质其分子结构不同,对不同波长光的吸收能力也不同,因此具有特征结构的结构集团,存在选择吸收特性的最大实收波长,形成最大吸收峰,而产生特有的吸收光谱。
即使是相同的物质由于其含量不同,对光的吸收程度也不同。利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在(定性分析),或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量(定量分析)的方法,称为分光光度法。
扩展资料
分光光度法中标准曲线的影响因素
1) 分析法自身的精密度:
如显色反应灵敏度不高时,被测物质低于某一浓度就不能显色,当显色溶液中的掩蔽剂或缓冲液能够络和少量被测离子,就会使标准曲线线性关系不好。如用铬酸钡分光光度法测定水中硫酸盐、用双硫腙分光光度法测水中锌时,在标准曲线的低浓度区间就有可能有此现象。
2) 测定用仪器(包括量具)的精密度:
在分光光度法中要求在最大吸收峰处测定吸光度,分光光度计有效谱带宽度越窄越好,有利于获得纯度高的单色光,当单色光的纯度不够时,测定的吸光度就会偏低。
3)易挥发溶剂所引起的测定溶液浓度改变:
如用亚甲蓝分光光度法测定阴离子合成洗涤剂时用四氯化碳、氯仿溶剂,因溶剂挥发性及实验时间的延长,会使测定的溶液浓度增大,导致吸光度重现性较差e799bee5baa6e79fa5e98193e78988e69d83365。
4) 污染:
制作标准曲线的操作步骤中,当存在损失或沾污时,会造成相关系数达不到实验要求。
5) 空白值:
空白值影响测定方法的检出限,也影响测定结果重现性,特别是对低浓度样品的测定,因此应引起足够重视,影响空白值主要因素有:纯水的纯度、操作过程中的沾污、实验条件的异常变化等,这些因素对测定的影响程度经常变化,并非是一恒定的数值。
但在同一组数据中,这些因素对每一测定结果的影响基本一致。因此在每一组测定中进行空白实验是十分必要的。
由于空白值与诸多因素有关,且是影响测定结果准确度的重要指标,应对其严格控制,并可作为实验室自我评价的重要依据,在测定工作中应设法降低空白值,当空白值过高时,应根据其主要影响因素,全面进行检验。
参考资料来源:百度百科-标准曲线
参考资料来源:百度百科-分光光度法
是有影响的,光亮度太高,影响视野的观测范围。
光亮度(luminance)又称发光率,是指一个表面的明亮程度,以L表示, 即光源在垂直其光传输方向的平面上的正投影单位表面积单位立体角内发出的光通量。